A medida que se profundiza el tejido de cartílago articular, más investigadores se centran en cómo cultivar y estudiarlo in vitro. Como dispositivo que simula el entorno de las articulaciones humanas, el bioreactor articular del cartílago se está convirtiendo gradualmente en una herramienta importante para la investigación del cartílago.
Bioreactor de cartílago articulares un dispositivo para el culto y mantenimiento de condrocitos articulares humanos y se puede utilizar para estudiar biología de cartílago y explorar tratamientos. Generalmente consta de múltiples capas de componentes, incluyendo una cámara de cultivo celular, sistema de circulación de fluidos, sensor de presión y controlador de temperatura. Su principio básico es cultivar tejido de cartílago articular sobre una matriz artificial permeable, porosa y elástica y promover su crecimiento y desarrollo a través de estímulos fisiológicos simulados, como el movimiento articular, la presión y el timón. Sus componentes principales incluyen una cámara de cultivo, matriz artificial, sensor de presión, bomba de líquido y sistema de control.
Lo siguiente es:Bioreactor de cartílago articularorientación general de funcionamiento.
1. Preparación:
1 Limpieza: asegúrese de que el equipo esté limpio antes de usar. Limpiar todos los componentes, incluyendo platos culturales, andamios y tapas de sellado, con limpiador estéril y desinfectante, luego enjuagar a fondo.
2 Operación aséptica: mantener un entorno aséptico. Trabaja en un armario estéril y usa guantes estériles, una máscara y ropa de laboratorio estéril.
2. Cultura celular:
1 Selección celular: elegir un tipo de célula apropiado para la cultura. Las opciones comunes incluyen condrocitos, células madre y otras células relacionadas con la tejido articular.
2 Medio de cultivo celular: preparar un medio formulado para el tipo de célula y los requisitos experimentales. Asegúrese de que contenga los nutrientes necesarios y los factores de crecimiento.
3 Célula de siembra: células de semilla en el plato de cultivo. Determinar la densidad celular y el método de siembra según requisitos experimentales.
3. Configuración de bioreactor de cartílago articular:
1 Instalación de andamio: instalar el andamio en el plato de cultivo y asegurar un contacto cercano con el fondo.
2 Aceite cultural: coloque la tapa de sellado en el plato y asegure un contacto cercano con su borde. Confirme que la tapa proporciona un sellado adecuado de gas y peso líquido.
3 Liquid addition: add an appropriate amount of medium to the culture pla according to experimental requirements so the liquid covers the cells.
4. Control de parámetros ambientales:
1 Temperatura: colocar el bioreactor de cartílago articular en una cámara de temperatura constante o incubador. Establezca una temperatura adecuada según el tipo de célula y los requisitos experimentales.
2 concentraciónCO2: algunos tipos de células pueden requerirCO2controlado. Utilice un dispositivo de controlCO2para mantener su concentración estable en el entorno cultural.
3 Humedad: mantener la humedad adecuada para prevenir la evaporación media y la deshidratación celular. Use un dispositivo de control de humedad adecuado o bandeja de agua.
5. Cultura y observación:
1 Duración de la cultura: determinar una duración adecuada según el objetivo experimental y el tipo de célula. Observar y registrar regularmente el crecimiento celular y los cambios morfológicos.
2 Reemplazo medio: reemplazar el medio periódicamente según sea necesario para mantener un entorno adecuado de crecimiento celular.
3 Tratamiento celular: según requisitos experimentales, tratar las células mediante la adición de medicamentos o factores de crecimiento o la aplicación de estimulación celular.
6. Análisis de resultados:
1 Coleccion celular: después de la cultura, recoge células según sea necesario para el análisis posterior, como el conteo celular, el análisis de la expresión genética o la detección de proteínas.
2 Análisis histológico: si es necesario, fijar y seccionar las células, luego mancharlas y examinarlas microscópicamente.